Plasmide Double Nickase (h) WDSOF1: sc-411819-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) WDSOF1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide WDSOF1 Double Nickase (h) et le plasmide WDSOF1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DCAF13. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) WDSOF1 | sc-411819-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain DCAF13 (également connu sous le nom de WDSOF1) code un facteur associé à DDB1 et à CUL4, supposé agir comme récepteur de substrat au sein des complexes ligase E3 d’ubiquitine CUL4–DDB1, en soutenant l’ubiquitination sélective et la protéostasie. Par un contrôle de la stabilité des protéines dépendant de l’ubiquitine, DCAF13 peut influencer la progression du cycle cellulaire, l’organisation nucléaire et les programmes de signalisation répondant au stress. Une régulation altérée des voies des ligases d’ubiquitine est fréquemment liée à une prolifération dérégulée et au maintien du génome, ce qui fait de DCAF13 une cible pertinente pour des études mécanistiques du contrôle de la croissance et du remodelage du protéome. Dans des contextes de recherche biomédicale, la perturbation de DCAF13 est utilisée pour examiner comment l’ubiquitination dépendante de CUL4/DDB1 s’articule avec la régulation transcriptionnelle et la fitness cellulaire.
WDSOF1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DCAF13 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DCAF13. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DCAF13. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DCAF13.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.