Plasmide Double Nickase (h) USP20: sc-406849-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) USP20 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide USP20 Double Nickase (h) et le plasmide USP20 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant USP20. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) USP20 | sc-406849-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) USP20 | sc-406849-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP20 code pour l’ubiquitine-spécifique peptidase 20 (USP20), une enzyme de désubiquitination qui modifie les chaînes d’ubiquitine afin de moduler la stabilité des protéines, leur trafic intracellulaire et la durée des signaux. En inversant l’ubiquitination de certains substrats, USP20 influence la protéostasie et peut ajuster des cascades de signalisation associées aux récepteurs et aux kinases, notamment des voies qui convergent vers la signalisation inflammatoire et le contrôle de la croissance cellulaire. L’activité de l’USP20 a été associée à la régulation de nœuds de signalisation clés tels que la β-caténine et HIF‑1α, ce qui la relie à des processus incluant les réponses à l’hypoxie, des programmes transcriptionnels et l’adaptation cellulaire au stress. Des dynamiques de désubiquitination altérées impliquant USP20 sont étudiées dans des contextes tels que la biologie tumorale, l’inflammation vasculaire et les dérégulations métaboliques, où le remaniement de la signalisation dépendante de l’ubiquitine est un trait fréquent.
USP20 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus USP20 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de USP20. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de USP20. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de USP20.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.