Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO UPIIIa (h): sc-401796
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- UPIIIa Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique UPIIIa, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: UPIIIa Antibody (C-6): sc-166808
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO UPIIIa (h) | sc-401796 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
UPK3A code l’uroplakine IIIa (UPIIIa), un composant intégral de membrane de type tétraspanine des plaques d’uroplakines, qui renforcent la surface apicale des cellules « parapluie » urothéliales différenciées. UPIIIa s’assemble avec d’autres uroplakines pour organiser des domaines membranaires spécialisés qui soutiennent la fonction barrière, la différenciation de surface et la résistance mécanique lors du remplissage et de la vidange de la vessie. Par son rôle dans la polarité épithéliale et le trafic des protéines membranaires, UPK3A contribue à l’homéostasie de l’urothélium et aux réponses aux lésions. Les modifications des profils d’expression des uroplakines sont fréquemment étudiées comme caractéristiques moléculaires de l’état de différenciation urothéliale dans les travaux sur la pathologie vésicale et le remodelage épithélial.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO UPIIIa (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène UPK3A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du UPK3A, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert UPK3A à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine UPIIIa.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en UPK3A pour l'étude de la signalisation de UPIIIa, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de UPK3A essentiels à la fonction de UPIIIa
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de UPK3A pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le UPIIIa plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le UPIIIa plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus UPK3A. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le UPIIIa plasmide HDR (h) et le UPIIIa (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie UPK3A pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles UPK3A définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.