Plasmide Double Nickase (h) UNKL: sc-413020-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) UNKL correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide UNKL Double Nickase (h) et le plasmide UNKL Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant UNKL. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: UNKL Antibody (F-8): sc-398716
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) UNKL | sc-413020-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) UNKL | sc-413020-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UNKL code une protéine humaine encore mal caractérisée, dont on pense qu’elle participe à l’organisation intracellulaire et à des processus associés aux membranes, avec des liens émergents avec la régulation dépendante de l’ubiquitine de la stabilité des protéines et du trafic intracellulaire. D’après des domaines prédits et des données fonctionnelles limitées, UNKL pourrait influencer la protéostase et les sorties de signalisation en modulant le renouvellement ou la localisation de protéines cibles spécifiques. Une régulation altérée de ces voies peut affecter les transitions d’état cellulaire, les réponses au stress et le contrôle de la croissance, faisant d’UNKL une cible d’intérêt pour des études à l’échelle des systèmes sur l’architecture des voies. Des jeux de données d’expression et d’associations génétiques ont suggéré une pertinence potentielle en biologie des maladies, notamment dans des contextes où une homéostasie protéique et une signalisation dérégulées contribuent à la dysfonction cellulaire.
UNKL Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus UNKL dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de UNKL. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de UNKL. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de UNKL.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.