Plásmido Doble Nickase (h) UCP2: sc-400319-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)UCP2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa UCP2 (h) y el plásmido de doble nickasa UCP2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a UCP2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: UCP2 Anticuerpo (G-6): sc-390189
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) UCP2 | sc-400319-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) UCP2 | sc-400319-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UCP2 codifica la proteína desacoplante mitocondrial 2, un transportador de la membrana interna que modula la fuga de protones para ajustar la eficiencia de la fosforilación oxidativa y el potencial de membrana mitocondrial. Al modelar la producción de ROS, el equilibrio NADH/NAD⁺ y el uso de sustratos, UCP2 influye en vías bioenergéticas y ligadas al estado redox, incluidas las respuestas al estrés mitocondrial, la señalización del inflamasoma y la dinámica de la secreción de insulina. La actividad alterada de UCP2 se ha asociado con desregulación metabólica, estados de activación de células inmunitarias y fenotipos de supervivencia de células cancerosas, donde el acoplamiento mitocondrial y la tolerancia al estrés oxidativo actúan como presiones selectivas. En consecuencia, UCP2 se estudia con frecuencia en el contexto de la función mitocondrial, la biología del estrés oxidativo y la reprogramación metabólica.
UCP2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus UCP2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de UCP2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de UCP2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con UCP2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.