TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407927

Visão geral

TTF1 (fator de terminação da transcrição 1; também conhecido como TTFC) é uma proteína nucleolar ligante de DNA que regula a terminação da transcrição pela RNA polimerase I e contribui para a organização da cromatina do rDNA e para a arquitetura do nucléolo. Ao ligar-se a elementos terminadores específicos nas repetições do DNA ribossomal, o TTF1 ajuda a coordenar a síntese de rRNA com eventos de replicação e reparo no locus de rDNA, influenciando a biogênese de ribossomos e a proteostase. O controle alterado da transcrição pela Pol I e da função nucleolar é uma característica marcante do estresse proliferativo e é frequentemente estudado no contexto da sinalização oncogênica, da instabilidade genômica e da senescência celular. Como resultado, o TTF1 é comumente investigado em vias que conectam a homeostase nucleolar, a regulação transcricional e as respostas de checkpoint do ciclo celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TTF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TTF1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TTF1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TTF/Transcription Termination Factor/TTF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TTF1 para a investigação da sinalização de TTF/Transcription Termination Factor/TTF1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TTF1 críticos para a função TTF/Transcription Termination Factor/TTF1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TTF1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TTF1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TTF1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TTF1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.