TSPO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406342

概要

TSPO2（トランスロケータータンパク質2）はミトコンドリア関連のTSPOファミリーに属する分子で、主に赤血球系譜の細胞で発現し、終末赤芽球形成および赤血球成熟を支えています。ミトコンドリア膜の構築や代謝物／ポルフィリンの取り扱いの制御に関与するとされており、TSPO2の活性はヘム合成や赤血球系分化プログラムと結び付けて考えられています。これらの過程を通じて、TSPO2は網状赤血球のリモデリングの際の細胞内レドックスバランスやミトコンドリア機能に影響を与えます。TSPO2の発現量や機能の変化は、赤血球系の疾患や貧血関連の表現型との関連で検討されており、造血系における機構解析研究の有用な標的となっています。

TSPO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTSPO2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TSPO2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TSPO2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TSPO2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TSPO2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TSPO2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TSPO2の機能に不可欠なTSPO2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TSPO2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TSPO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTSPO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TSPO2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TSPO2 HDRプラスミド（h）および TSPO2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTSPO2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTSPO2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。