Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO TrpRS (m): sc-423692
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TrpRS Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TrpRS, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TrpRS Antibody (C-7): sc-374401
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TrpRS (m) | sc-423692 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Wars code pour la tryptophanyl‑ARNt synthétase (TrpRS), une aminoacyl‑ARNt synthétase cytosolique qui fixe la L‑tryptophane à son ARNt^Trp cognat, fournissant l’ARNt chargé nécessaire à une traduction fidèle de l’ARNm. En contrôlant le chargement des ARNt et en soutenant l’élongation ribosomique, TrpRS contribue à coupler la disponibilité en nutriments à la synthèse protéique et aux programmes cellulaires d’adaptation au stress. Une perturbation de l’activité des aminoacyl‑ARNt synthétases peut affecter la protéostasie, la signalisation intégrée du stress et la fidélité de la traduction, des processus fréquemment impliqués dans l’inflammation, la neurodégénérescence et la transformation oncogénique. Le gène Wars chez la souris constitue donc un nœud d’étude utile pour comprendre comment une capacité de traduction altérée remodèle l’état cellulaire et des phénotypes pertinents pour les maladies, in vitro comme in vivo.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TrpRS (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Wars dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Wars, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Wars à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TrpRS.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Wars pour l'étude de la signalisation de TrpRS, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Wars essentiels à la fonction de TrpRS
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Wars pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TrpRS plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le TrpRS plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Wars. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TrpRS plasmide HDR (m) et le TrpRS (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Wars pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Wars définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.