TRMT6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412224

概要

TRMT6は、TRMT61Aと複合体を形成して細胞質tRNAに保存的なm1A58修飾を導入する、tRNA（アデニン（58）-N1）メチルトランスフェラーゼ複合体の触媒サブユニットをコードしています。このRNA修飾は、tRNAの構造安定性、正確なコドン解読、効率的な翻訳を支え、TRMT6の活性をプロテオスタシスや細胞ストレス応答と結び付けます。tRNAメチル化の攪乱は、全体的な翻訳プログラムを乱し得るほか、複数のモデル系において増殖やゲノム維持経路の変化と関連することが示されています。そのためTRMT6は、RNAエピトランスクリプトーム制御、翻訳制御、ならびに疾患に関連する細胞増殖やストレス適応の変化という観点から研究されています。

TRMT6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTRMT6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TRMT6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TRMT6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TRMT6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TRMT6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TRMT6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TRMT6の機能に不可欠なTRMT6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TRMT6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TRMT6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTRMT6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TRMT6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TRMT6 HDRプラスミド（h）および TRMT6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTRMT6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTRMT6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。