Plasmide Double Nickase (h) TMEM92: sc-407271-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TMEM92 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TMEM92 Double Nickase (h) et le plasmide TMEM92 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TMEM92. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TMEM92 | sc-407271-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TMEM92 | sc-407271-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TMEM92 code une protéine transmembranaire multipasse prédite, dont l’annotation fonctionnelle reste limitée, et que l’on pense localisée aux membranes cellulaires, où elle pourrait contribuer à l’organisation membranaire, au trafic intracellulaire ou à la transduction des signaux. Comme d’autres membres de la famille TMEM, TMEM92 suscite de l’intérêt pour comprendre comment les protéines ancrées dans les membranes façonnent la communication entre organites et l’homéostasie cellulaire. Des altérations au niveau des transcrits de gènes transmembranaires peu caractérisés sont fréquemment observées dans divers jeux de données liés aux maladies, notamment le cancer et les affections immunitaires, ce qui motive des études mécanistiques de TMEM92 dans des modèles cellulaires pertinents. L’exploration fonctionnelle de TMEM92 peut aider à préciser ses rôles dans la croissance cellulaire, les réponses au stress et les interactions entre voies de signalisation dépendant de réseaux protéiques localisés aux membranes.
TMEM92 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TMEM92 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TMEM92. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TMEM92. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TMEM92.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.