Plasmide Double Nickase (h) TM4SF1: sc-404779-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TM4SF1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TM4SF1 Double Nickase (h) et le plasmide TM4SF1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TM4SF1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TM4SF1 | sc-404779-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TM4SF1 | sc-404779-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TM4SF1 (transmembrane 4 L six family member 1) code une glycoprotéine de surface cellulaire de type tétraspanine qui organise des microdomaines membranaires et module les interactions cellule–cellule et cellule–matrice. Elle participe à des processus liés au remodelage du cytosquelette, à l’adhésion cellulaire, à la migration et au dialogue de signalisation avec les intégrines et les voies des facteurs de croissance. L’expression de TM4SF1 est fréquemment utilisée comme marqueur d’états endothéliaux et épithéliaux activés et a été associée à des programmes angiogéniques, à des phénotypes invasifs et au remodelage du microenvironnement tumoral. Par conséquent, TM4SF1 est largement étudiée dans les mécanismes sous-jacents à la biologie vasculaire, à la progression métastatique et à la signalisation d’adaptation au stress dans des modèles de cancer.
TM4SF1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TM4SF1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TM4SF1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TM4SF1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TM4SF1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.