Plasmide Double Nickase (h) TIS11D: sc-405406-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TIS11D correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TIS11D Double Nickase (h) et le plasmide TIS11D Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZFP36L2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TIS11D Antibody (A-3): sc-365908
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TIS11D | sc-405406-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **ZFP36L2** code la protéine de liaison à l’ARN **TIS11D**, un facteur à doigts de zinc de type **CCCH** qui reconnaît des éléments riches en AU dans les **3′ UTR** afin de favoriser la désadénylation et la dégradation des ARNm. En régulant la stabilité des transcrits, TIS11D façonne des programmes d’expression génique liés au développement, à l’activation et à la différenciation des lymphocytes, en s’inscrivant à l’interface de la signalisation inflammatoire associée aux voies **MAPK** et **NF-κB**, ainsi que de réseaux plus larges de contrôle post‑transcriptionnel. **ZFP36L2** a été impliqué dans l’homéostasie immunitaire et dans des phénotypes oncogéniques en contexte hématologique, où une altération du renouvellement des ARN peut influencer la prolifération, l’apoptose et l’engagement de lignée. Ces caractéristiques font de **ZFP36L2** un nœud utile pour disséquer les voies de dégradation des ARN et les sorties transcriptionnelles liées à l’immunité dans des modèles de cellules humaines.
TIS11D Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZFP36L2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZFP36L2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZFP36L2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZFP36L2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.