Teneurin-1 Plasmídeo de ativação de CRISPR (h): sc-408663-ACT

O gene humano **TENM1** codifica a teneurina-1, uma grande glicoproteína transmembranar do tipo II, enriquecida no sistema nervoso, que medeia a adesão célula–célula e a sinalização dependente de contato durante a orientação axonal, a organização de sinapses e a formação de circuitos neuronais. A teneurina-1 participa de interações com a matriz extracelular e de programas de reconhecimento trans-sináptico que moldam o crescimento de neuritos e a conectividade, integrando-se a redes de sinalização do desenvolvimento que regulam a remodelagem do citoesqueleto e o estado transcricional. Alterações genéticas e de expressão em **TENM1** têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e à biologia tumoral, sustentando sua relevância em estudos de diferenciação neuronal, migração e comunicação celular aberrante. Essas propriedades tornam **TENM1** um alvo útil para dissecar vias que governam o desenvolvimento neural e mudanças, relevantes para doenças, na adesão e na sinalização celulares.

Teneurin-1 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de TENM1 sem alterar a sequência de ADN subjacente.

Teneurin-1 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus TENM1 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição TENM1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de Teneurin-1. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus TENM1 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de Teneurin-1 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via Teneurin-1 em células tumorais com expressão de TENM1 silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.