Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO T3JAM (h): sc-405338
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- T3JAM Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique T3JAM, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: T3JAM Antibody (B-7): sc-398781
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO T3JAM (h) | sc-405338 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
TRAF3IP3 (T3JAM) est une protéine de type adaptateur impliquée dans la signalisation des cellules immunitaires, reliant les événements proximaux aux récepteurs à des cascades de kinases en aval qui façonnent les programmes d’activation, de survie et de différenciation. Elle a été associée à la régulation de processus liés aux voies MAPK et NF-κB et peut influencer les sorties transcriptionnelles au cours du développement des lymphocytes et de la signalisation des récepteurs antigéniques. Des altérations de l’expression ou de la fonction de TRAF3IP3 ont été étudiées dans le contexte d’une signalisation inflammatoire dérégulée et de voies associées aux hémopathies malignes, où des changements d’équilibre entre voies peuvent affecter la prolifération cellulaire et l’apoptose. Ces propriétés font de TRAF3IP3 une cible utile pour disséquer l’intégration des signaux dans des systèmes modèles hématopoïétiques et d’origine immunitaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO T3JAM (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TRAF3IP3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TRAF3IP3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TRAF3IP3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine T3JAM.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TRAF3IP3 pour l'étude de la signalisation de T3JAM, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de TRAF3IP3 essentiels à la fonction de T3JAM
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TRAF3IP3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le T3JAM plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le T3JAM plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TRAF3IP3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le T3JAM plasmide HDR (h) et le T3JAM (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TRAF3IP3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TRAF3IP3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.