Stomatin Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420189-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- StomatinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Stomatin (m) e o Plasmídeo Double Nickase Stomatin (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Stom. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Stomatin Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420189-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Stomatin Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420189-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Stom** em camundongo codifica a **estomatina**, uma proteína integral de membrana enriquecida em *lipid rafts* que atua como arcabouço de microdomínios de membrana e modula a atividade de canais iônicos e transportadores. A estomatina participa da regulação da rigidez da membrana, do tráfego vesicular e da sinalização mecanossensorial, com interações descritas que afetam vias ligadas à homeostase de Na⁺/K⁺ e à função de canais iônicos sensíveis a ácido. Em contextos hematopoéticos e neurais, proteínas da família da estomatina estão associadas à organização da membrana de eritrócitos e à excitabilidade de neurônios sensoriais, tornando **Stom** um lócus útil para estudar biofísica de membranas e regulação de canais. Processos ligados à estomatina quando desregulados têm sido associados a fenótipos envolvendo estabilidade de membrana alterada e resposta a estímulos, sustentando sua relevância em modelos de distúrbios de hemácias e disfunção sensorial.
Stomatin O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Stom em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Stom. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Stom. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Stom interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.