Plasmide Double Nickase (h) SSTR1: sc-403410-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SSTR1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SSTR1 Double Nickase (h) et le plasmide SSTR1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SSTR1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SSTR1 Antibody (1F7): sc-293490
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SSTR1 | sc-403410-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SSTR1 | sc-403410-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SSTR1 code le récepteur de la somatostatine 1, un RCPG couplé à Gi/o qui se lie aux peptides de somatostatine afin d’inhiber l’activité de l’adénylate cyclase, de réduire la production d’AMPc et de moduler des effecteurs en aval tels que les voies de signalisation MAPK/ERK et PI3K. Par ces voies, SSTR1 influence les flux de calcium, l’activité des canaux ioniques et des programmes transcriptionnels qui régulent l’excitabilité neuronale, la sécrétion endocrine et le contrôle du cycle cellulaire. La signalisation du récepteur contribue à une rétroaction coordonnée dans les systèmes neuroendocrinien et gastro-intestinal, où le tonus somatostatinergique façonne la libération hormonale et la transmission synaptique. Une expression ou une signalisation dérégulée des récepteurs de la somatostatine a été associée à une différenciation neuroendocrine altérée et à des phénotypes prolifératifs, ce qui étaye son utilisation comme cible mécanistique dans les études de biologie tumorale et de régulation neurale/endocrine.
SSTR1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SSTR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SSTR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SSTR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SSTR1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.