SRY CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404342

개요

SRY는 성결정 영역 Y 전사인자를 암호화하며, HMG-box DNA 결합 단백질로서 초기 생식샘 분화를 고환 발달 방향으로 유도함으로써 남성 성결정을 개시합니다. SRY는 양방향 잠재성을 지닌 생식샘에서 전사 프로그램을 조절하여 SOX9 활성화를 비롯한 하위 경로와, 세르톨리(Sertoli) 세포 계통으로의 운명 결정 및 난소 형성 촉진 신호의 억제를 조정하는 광범위한 유전자 네트워크를 구동합니다. SRY 기능의 손상 또는 조절 이상은 46,XY 생식샘 이형성증과 성역전 표현형을 포함한 성발달 이상(DSD)과 연관되어 있어, 발달 운명 결정에 대한 전사 조절을 연구하는 핵심 표적으로 여겨집니다. 세포 모델에서 SRY는 크로마틴 의존적 유전자 조절과 계통 특이적 전사인자 활성의 작동을 규명하기 위한 다루기 쉬운 연구 노드로 활용됩니다.

SRY CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SRY 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SRY 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SRY의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SRY 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SRY 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SRY 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SRY 기능에 중요한 SRY 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SRY 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SRY CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 SRY CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SRY 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SRY HDR 플라스미드 (h) 및 SRY HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SRY 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SRY 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.