Plasmide Double Nickase (h) SR-7: sc-404174-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SR-7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SR-7 Double Nickase (h) et le plasmide SR-7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HTR7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SR-7 | sc-404174-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SR-7 | sc-404174-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **HTR7** code le récepteur de la sérotonine 7 (SR‑7), un récepteur couplé aux protéines G qui transmet principalement son signal via **Gαs** afin de stimuler l’adénylate cyclase, d’augmenter l’AMPc et d’activer des programmes transcriptionnels dépendants de **PKA/CREB**. SR‑7 interagit également avec les plateformes d’échafaudage de la **β‑arrestine** et peut moduler la signalisation **ERK/MAPK**, reliant les entrées sérotoninergiques à des changements de l’excitabilité neuronale, de la plasticité synaptique et de la régulation circadienne. Dans le système nerveux central, l’activité de HTR7 contribue à des processus neurodéveloppementaux et neurophysiologiques, et une dérégulation de la signalisation des GPCR sérotoninergiques a été associée à des phénotypes neuropsychiatriques et liés au sommeil. En dehors du cerveau, la signalisation de l’AMPc médiée par SR‑7 constitue une voie particulièrement utile pour étudier la désensibilisation des GPCR, le trafic des récepteurs et la dynamique des seconds messagers.
SR-7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HTR7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HTR7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HTR7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HTR7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.