Plasmide Double Nickase (h) SNX10: sc-416307-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SNX10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SNX10 Double Nickase (h) et le plasmide SNX10 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SNX10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SNX10 Antibody (1G5): sc-293380
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SNX10 | sc-416307-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SNX10 | sc-416307-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SNX10 (sorting nexin 10) est une sorting nexin à domaine PX qui se lie aux phosphoinositides et contribue à coordonner le trafic membranaire endosomal, le tri des cargaisons et la dynamique des organites. En couplant la reconnaissance des lipides aux machines du transport vésiculaire, SNX10 participe à la maturation des endosomes, au renouvellement des récepteurs et à l’homéostasie de la signalisation intracellulaire. L’activité de SNX10 a également été associée à la fonction des ostéoclastes et aux processus d’acidification vésiculaire qui influencent le remodelage osseux et les voies de dégradation cellulaire. La dérégulation des programmes de trafic associés à SNX10 est pertinente pour les études de biologie du squelette et des troubles impliquant un transport endolysosomal altéré.
SNX10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SNX10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SNX10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SNX10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SNX10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.