Smad1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400182-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Smad1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Smad1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Smad1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SMAD1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Smad1 Anticorpo (913C1b): sc-81378
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Smad1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400182-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Smad1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400182-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMAD1 codifica a Smad1, uma SMAD regulada por receptor que transmite sinais de proteínas morfogenéticas ósseas (BMP) de receptores serina/treonina quinase ativados até ao núcleo. Após fosforilação, a Smad1 forma complexos com a SMAD4 para regular programas de transcrição que controlam o padrão embrionário, a diferenciação osteogénica e condrogénica e decisões mais amplas de destino celular. A atividade da Smad1 é modulada por crosstalk entre vias, incluindo MAPK e a degradação mediada por ubiquitina, o que modela a amplitude e a duração do sinal. A desregulação da sinalização BMP/SMAD1 tem sido implicada em anomalias do desenvolvimento e em estados de diferenciação aberrantes relevantes para a biologia do cancro e a remodelação tecidular.
Smad1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SMAD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SMAD1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SMAD1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SMAD1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.