SLC43A2 Double Nickase Plasmid (m): sc-431993-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SLC43A2 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SLC43A2 Double-Nickase-Plasmid (m) und SLC43A2 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Slc43a2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SLC43A2 Double Nickase Plasmid (m) | sc-431993-NIC | 20 µg | $410.00 |
Slc43a2 kodiert den murinen großen neutralen Aminosäuretransporter SLC43A2 (LAT4), ein Membranprotein, das die natriumunabhängige Aufnahme und den Efflux essenzieller und verzweigtkettiger Aminosäuren wie Leucin, Isoleucin und Valin vermittelt. Durch die Regulation der intrazellulären Aminosäureverfügbarkeit beeinflusst SLC43A2 Nährstoffsensorik-Programme, darunter die mTORC1-Signalübertragung, die Translationskontrolle und eine umfassendere metabolische Homöostase. Eine veränderte Aminosäuretransportaktivität ist häufig mit Änderungen des Zellwachstums, der Stressanpassung und der Funktion von Immunzellen verknüpft, wodurch Slc43a2 für Studien zur metabolischen Reprogrammierung und zur Nährstoffkonkurrenz im Mikromilieu relevant ist. Eine dysregulierte Transporteraktivität wurde in experimentellen Krebs- und Immunmetabolismus-Modellen mit proliferativen Phänotypen in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als mechanistischer Knotenpunkt, der Transport und Signalgebung verknüpft, unterstützt.
SLC43A2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Slc43a2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Slc43a2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Slc43a2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Slc43a2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.