Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SIRT1 Antibody (B-7): sc-74465. Western blot analysis of SIRT1 expression in K-562 nuclear extract (A) and BJAB (B), MES-SA/Dx5 (C) and F9 (D) whole cell lysates.
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SIRT1双切口酶质粒(m): sc-430046-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SIRT1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SIRT1双切酶质粒（m）和SIRT1双切酶质粒（m2）编码针对Sirt1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SIRT1: sc-74465，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SIRT1双切口酶质粒(m) | sc-430046-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIRT1双切口酶质粒(m2) | sc-430046-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Sirt1 基因编码 SIRT1，这是一种 NAD⁺ 依赖性的去乙酰化酶，能够将细胞能量状态与染色质重塑及转录调控相耦联。SIRT1 调控多种关键因子的乙酰化水平，包括 p53、FOXO 蛋白、PGC-1α 和 NF-κB，从而影响应激反应、线粒体生物发生、炎症、自噬以及细胞周期检查点。通过与 AMPK–mTOR 信号及代谢通路的串扰，SIRT1 参与对营养供给变化与氧化应激的适应性反应。在模型系统中，SIRT1 活性异常与代谢功能障碍、神经退行性相关过程以及肿瘤生物学有关，因此它是表观遗传与信号网络中被广泛研究的关键节点。
SIRT1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Sirt1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sirt1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Sirt1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Sirt1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。