Plasmide Double Nickase (m) Serpinb3a: sc-422808-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Serpinb3a correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Serpinb3a Double Nickase (m) et le plasmide Serpinb3a Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Serpinb3a. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Serpinb3a | sc-422808-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Serpinb3a | sc-422808-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Serpinb3a code un inhibiteur murin de protéase à sérine de la clade B (serpine), impliqué dans la régulation de la protéolyse intracellulaire, de l’homéostasie des cellules épithéliales et de la signalisation en réponse au stress. En modulant l’activité des protéases et la protéostasie, Serpinb3a peut influencer les cascades inflammatoires, la sensibilité à l’apoptose et les processus de remodelage tissulaire. Les modifications des profils d’expression des serpines sont fréquemment étudiées dans le contexte des lésions épithéliales, du remodelage associé à la fibrose et des interactions entre cellules immunitaires et épithélium, où l’équilibre protéase–antiprotéase façonne l’intégrité de la barrière et les réponses induites par les cytokines. En tant qu’analogue fonctionnel de la biologie humaine des SERPINB3/B4, Serpinb3a est pertinent pour des études mécanistiques reliant l’inhibition des protéases à l’inflammation, au stress oxydatif et aux microenvironnements associés à la carcinogenèse dans des modèles murins.
Serpinb3a Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Serpinb3a dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Serpinb3a. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Serpinb3a. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Serpinb3a.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.