Plasmide Double Nickase (m) Serglycin: sc-422394-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Serglycin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Serglycin Double Nickase (m) et le plasmide Serglycin Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Srgn. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Serglycin Antibody (C-11): sc-374657
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Serglycin | sc-422394-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin Srgn code la serglycine, un protéoglycane sécrété et associé aux granules, qui porte des chaînes de sulfate de chondroïtine permettant d’empaqueter et de stabiliser des médiateurs cationiques tels que des protéases, des chimiokines et des peptides antimicrobiens. La serglycine contribue à l’exocytose régulée et au remodelage de la matrice extracellulaire, influençant la dégranulation des cellules immunitaires, la signalisation inflammatoire et la communication cellule–cellule. Dans les lignées hématopoïétiques et myéloïdes, elle soutient la biogenèse des granules et le stockage de molécules effectrices qui façonnent les réponses immunitaires innée et adaptative. Des altérations de l’expression de la serglycine ou de la composition en glycosaminoglycanes ont été associées à une inflammation dérégulée et à des processus du microenvironnement tumoral, faisant de Srgn un point d’intérêt utile pour des études mécanistiques de la modulation immunitaire et des voies dépendantes des protéases.
Serglycin Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Srgn dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Srgn. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Srgn. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Srgn.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.