Plasmide Double Nickase (h) SEMA3C: sc-402489-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SEMA3C correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SEMA3C Double Nickase (h) et le plasmide SEMA3C Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SEMA3C. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SEMA3C | sc-402489-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SEMA3C | sc-402489-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SEMA3C code la sémaphorine-3C, un signal de guidage sécrété qui transmet des signaux via les récepteurs neuropiline et plexine afin de réguler le remodelage du cytosquelette, la migration directionnelle et les interactions cellule–cellule. Outre ses rôles dans le guidage axonal et l’organisation morphogénétique liée aux crêtes neurales, SEMA3C influence le remodelage angiogénique et lymphatique et peut moduler les comportements d’adhérence et d’invasion via des voies dépendantes des GTPases de la famille Rho. Une expression dérégulée de SEMA3C a été rapportée dans de multiples contextes pathologiques, notamment le remodelage associé aux tumeurs et les pathologies vasculaires, ce qui en fait une cible utile pour étudier la signalisation de guidage, les interactions avec le microenvironnement et les phénotypes migratoires dans des modèles cellulaires humains.
SEMA3C Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SEMA3C dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SEMA3C. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SEMA3C. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SEMA3C.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.