Plasmide CRISPR/Cas9 KO SELENBP1 (m): sc-422870

Présentation

Selenbp1 code la protéine 1 de liaison au sélénium (SELENBP1), une protéine cytosolique impliquée dans la gestion cellulaire du sélénium et le métabolisme associé à l’état rédox. Dans les tissus murins, SELENBP1 est liée à la régulation des réponses au stress oxydatif et à l’adaptation métabolique, avec des liens rapportés avec le métabolisme des xénobiotiques et des programmes de différenciation cellulaire. Des modifications de l’abondance de SELENBP1 ont été associées à des changements de la prolifération et de la signalisation de stress dans de multiples systèmes expérimentaux, ce qui en fait une cible pertinente pour étudier des phénotypes métaboliques et rédox dépendants du contexte. En tant que facteur associé au sélénium, SELENBP1 constitue un point d’entrée aisément exploitable pour analyser comment l’utilisation du sélénium s’articule avec des voies homéostatiques qui façonnent la forme et la robustesse cellulaires.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SELENBP1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Selenbp1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Selenbp1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Selenbp1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SELENBP1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Selenbp1 pour l'étude de la signalisation de SELENBP1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Selenbp1 essentiels à la fonction de SELENBP1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Selenbp1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le SELENBP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le SELENBP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Selenbp1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le SELENBP1 plasmide HDR (m) et le SELENBP1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Selenbp1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Selenbp1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.