Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SDF-4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422857
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SDF-4 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SDF-4, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SDF-4 Anticuerpo (E-12): sc-393930
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SDF-4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422857 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Sdf4 codifica el factor 4 derivado de células del estroma (SDF-4), una proteína residente del retículo endoplásmico implicada en la homeostasis del calcio y en la función de la vía secretora. SDF-4 se asocia con el control de calidad del RE y con procesos de tráfico de proteínas que influyen en el transporte vesicular y en las respuestas celulares al estrés. A través de estas funciones, Sdf4 puede afectar programas de señalización vinculados a la comunicación celular dependiente de la secreción y a la homeostasis tisular. La desregulación del manejo del calcio en el RE y de la proteostasis es relevante para los mecanismos subyacentes a la disfunción metabólica, la neurodegeneración y fenotipos inflamatorios, lo que convierte a Sdf4 en un nodo útil para estudios centrados en vías.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SDF-4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sdf4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sdf4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sdf4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SDF-4.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sdf4 para la investigación de la señalización de SDF-4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Sdf4 críticos para la función de SDF-4
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sdf4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SDF-4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SDF-4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sdf4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SDF-4 (m) y el plásmido HDR SDF-4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sdf4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sdf4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.