Plasmide Double Nickase (h) Scn4b: sc-411001-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Scn4b correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Scn4b Double Nickase (h) et le plasmide Scn4b Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SCN4B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Scn4b | sc-411001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Scn4b | sc-411001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SCN4B code la sous-unité β4 du canal sodique (Scn4b), une protéine membranaire auxiliaire qui s’associe aux sous-unités α des canaux sodiques voltage‑dépendants afin d’influencer le gating du canal, son expression à la surface cellulaire et l’excitabilité. Au‑delà de la modulation de la génération des potentiels d’action, SCN4B a été impliqué dans la régulation de l’adhésion cellulaire et de la signalisation via des interactions à la membrane plasmique, susceptibles d’affecter l’organisation du cytosquelette et la composition des microdomaines membranaires. Une expression altérée de SCN4B ou certaines variantes sont étudiées dans le contexte de troubles liés à l’excitabilité et d’une signalisation électrique dérégulée, notamment des phénotypes cardiaques et neuromusculaires. En biologie du cancer, SCN4B a également été étudié comme modulateur de programmes de migration et d’invasion, ce qui le rend pertinent pour les voies régissant la transition épithélio‑mésenchymateuse et le comportement métastatique.
Scn4b Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SCN4B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SCN4B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SCN4B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SCN4B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.