Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (h) SCCA1/2: sc-418018-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SCCA1/2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SCCA1/2 Double Nickase (h) et le plasmide SCCA1/2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SERPINB4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SCCA1/2 Antibody (B-9): sc-28384
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SCCA1/2 | sc-418018-NIC | 20 µg | $410.00 |
SERPINB4 code l’antigène 1/2 du carcinome épidermoïde (SCCA1/2), un inhibiteur de protéase à sérine de clade B qui module la protéolyse péricellulaire et intracellulaire en ciblant des enzymes telles que les cathepsines et des protéases apparentées. En limitant l’activité des protéases, SCCA1/2 influence l’homéostasie de la barrière épithéliale, les réponses inflammatoires et des processus liés au stress, notamment l’apoptose, la fonction lysosomale et le remodelage du milieu extracellulaire. L’expression de SERPINB4 est enrichie dans les épithéliums stratifiés et peut être modifiée dans des contextes d’inflammation chronique et de dysplasie épithéliale, ce qui en fait un nœud moléculaire utile pour étudier l’équilibre protéases–antiprotéases. Une dérégulation de SCCA1/2 a été associée à des changements des microenvironnements adjacents à la tumeur et des réseaux de signalisation immunitaire, soulignant sa pertinence dans des études mécanistiques de la pathobiologie épithéliale.
SCCA1/2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SERPINB4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SERPINB4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SERPINB4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SERPINB4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.