SASH1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403567

Descripción general

SASH1 (SAM and SH3 domain containing 1) codifica una proteína adaptadora/de andamiaje que integra la señalización a través de módulos de interacción SAM y SH3 para coordinar la organización del citoesqueleto, la adhesión celular y el comportamiento migratorio. Se ha relacionado con la regulación de MAPK/ERK y otras vías impulsadas por quinasas que moldean la integridad epitelial, las respuestas al estrés y las decisiones de destino celular. Se han descrito alteraciones en la expresión o la función de SASH1 en múltiples tipos de cáncer y con frecuencia se estudia en el contexto de la invasión, fenotipos asociados a la metástasis y redes de señalización tipo supresor tumoral. SASH1 también es de interés en la biología vascular e inflamatoria, donde la señalización mediada por adaptadores puede influir en la función endotelial y las propiedades de barrera.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SASH1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SASH1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SASH1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SASH1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SASH1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SASH1 para la investigación de la señalización de SASH1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SASH1 críticos para la función de SASH1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SASH1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SASH1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SASH1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SASH1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SASH1 (h) y el plásmido HDR SASH1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SASH1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SASH1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.