SARM Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403427-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SARMO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SARM (h) e o Plasmídeo Double Nickase SARM (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SARM1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SARM Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403427-NIC | 20 µg | $410.00 |
SARM1 codifica a SARM, uma proteína adaptadora contendo atividade de NADase que atua como executora central da degeneração axonal. Após lesão neuronal ou estresse metabólico, a ativação de SARM1 desencadeia rápida depleção de NAD⁺, colapso energético e desmonte subsequente do citoesqueleto, integrando-se a vias que regulam a manutenção axonal, a função mitocondrial e a sinalização imune inata. A atividade desregulada de SARM1 tem sido associada a processos neurodegenerativos e neuroinflamatórios, incluindo neuropatias periféricas e perda de axônios observadas em múltiplos contextos de doenças neurológicas. Como um ponto de convergência para a autodestruição axonal induzida por lesão, SARM1 é amplamente estudada por seus papéis na sobrevivência neuronal, na sinalização de degeneração e nas respostas do estado celular ao estresse.
SARM O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SARM1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SARM1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SARM1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SARM1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.