Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Sam 68 (m): sc-422795
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Sam 68 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Sam 68, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Sam 68 Antibody (H-4): sc-514468
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Sam 68 (m) | sc-422795 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Khdrbs1 code pour la protéine de liaison à l’ARN Sam 68 (KHDRBS1), un régulateur de la famille STAR de l’expression génique post‑transcriptionnelle, qui couple la transduction du signal au métabolisme de l’ARN. Sam 68 se lie à des éléments ARN spécifiques pour contrôler l’épissage alternatif, l’export des ARNm, leur stabilité et leur traduction, et participe à des complexes ribonucléoprotéiques dynamiques, notamment des voies associées aux granules de stress. Par des interactions dépendantes de la phosphorylation avec des kinases de la famille Src et d’autres nœuds de signalisation, Sam 68 influence la progression du cycle cellulaire, l’apoptose et les programmes de différenciation. La dérégulation de l’épissage et du traitement de l’ARN médiés par KHDRBS1/Sam 68 a été associée à la signalisation oncogénique, à des phénotypes neurodéveloppementaux et à des états transcriptionnels liés à l’immunité, ce qui étaye son large intérêt pour des études mécanistiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Sam 68 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Khdrbs1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Khdrbs1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Khdrbs1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Sam 68.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Khdrbs1 pour l'étude de la signalisation de Sam 68, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Khdrbs1 essentiels à la fonction de Sam 68
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Khdrbs1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Sam 68 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Sam 68 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Khdrbs1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Sam 68 plasmide HDR (m) et le Sam 68 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Khdrbs1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Khdrbs1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.