Plasmide Double Nickase (h) Sall2: sc-405839-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Sall2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Sall2 Double Nickase (h) et le plasmide Sall2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SALL2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Sall2 Antibody (PL-A12): sc-135619
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Sall2 | sc-405839-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Sall2 | sc-405839-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SALL2 code un facteur de transcription à doigts de zinc impliqué dans la spécification du destin cellulaire, le développement neuronal et le maintien de l’homéostasie épithéliale, via une régulation spécifique de la séquence de l’expression génique. Sall2 participe à des programmes transcriptionnels à l’interface du contrôle du cycle cellulaire, des signaux de différenciation et des voies de réponse au stress, influençant des processus tels que la prolifération, l’apoptose et l’engagement de lignée. Une expression ou une activité régulatrice altérée de SALL2 a été associée à un dérèglement de voies développementales et de réseaux transcriptionnels liés aux tumeurs, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la régulation génique. En tant que protéine nucléaire se liant à l’ADN, Sall2 constitue un point d’entrée abordable pour disséquer la logique des promoteurs/activateurs (enhancers) et le remodelage des voies en aval dans des modèles de cellules humaines.
Sall2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SALL2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SALL2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SALL2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SALL2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.