RYK CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402654

개요

RYK(수용체 유사 티로신 키나아제)는 비정형 단일 통과 막관통 수용체를 암호화하며, 주로 비정형(비정규) WNT 신호전달에서 보조 수용체(co-receptor)로 기능합니다. 여기에는 세포 극성, 방향성 이동, 세포골격 역학을 조절하는 WNT5A 구동 경로가 포함됩니다. RYK는 WNT 리간드 및 Frizzled 수용체와의 상호작용을 통해 평면 세포 극성(planar cell polarity)과 JNK 같은 하위 효과인자에 영향을 줄 수 있으며, 세포외 신호를 전사 및 형태형성 프로그램과 연결합니다. RYK 활성은 신경 발달과 축삭 유도와 연관되어 왔고, RYK/WNT 신호의 조절 이상은 종양 세포 침윤, 전이 관련 표현형, 염증성 미세환경 등의 맥락에서 보고되었습니다. 이러한 특성으로 인해 RYK는 인간 세포 모델에서 WNT 신호, 세포 부착, 이동 행동 사이의 경로 간 상호작용(crosstalk)을 탐구하는 데 유용한 표적입니다.

RYK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 RYK 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 RYK 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 RYK의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 RYK 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 RYK 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 RYK 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• RYK 기능에 중요한 RYK 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 RYK 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• RYK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 RYK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 RYK 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  RYK HDR 플라스미드 (h) 및 RYK HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 RYK 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 RYK 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.