RPRD1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412911

Visão geral

RPRD1B codifica um regulador interator do CTD da RNA polimerase II que ajuda a coordenar o início, a elongação e a terminação da transcrição por meio da modulação dos estados de fosforilação do CTD da polimerase. Ao conectar o controle transcricional ao processamento de mRNA, RPRD1B contribui para programas globais de expressão gênica, incluindo redes de transcrição responsivas ao ciclo celular e ao estresse. A expressão ou função desregulada de RPRD1B tem sido associada a alterações na homeostase transcricional observadas em contextos relacionados ao câncer, nos quais mudanças na dinâmica da RNA polimerase II podem impactar a proliferação e a estabilidade genômica. Como regulador transcricional nuclear, também é relevante para estudos mecanísticos do processamento de RNA acoplado à transcrição e da regulação associada à cromatina.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RPRD1B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RPRD1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RPRD1B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RPRD1B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RPRD1B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RPRD1B para a investigação da sinalização de RPRD1B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RPRD1B críticos para a função RPRD1B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RPRD1B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo RPRD1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RPRD1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RPRD1B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo RPRD1B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RPRD1B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RPRD1B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RPRD1B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.