Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
RPA 32 kDa subunit Plasmides CRISPR (h)
- Espèces cibles : human; pour le produit correspondant mouse, voir >RPA 32 kDa subunit CRISPR Plasmids (m)
- Les plasmides CRISPR/Cas9 KO sont constitués de séquences d'ARN guide de 20 nt spécifiques de RPA 32 kDa subunit dérivées de la base de données GeCKO (v2)
- Pour le knockout de gène, les séquences d'ARN guide dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure double brin (DSB) dans l'ADN génomique
- Des plasmides CRISPR spécifiques pour le knockout et l'activation sont disponibles. Veuillez vous référer aux informations détailllées ici below
- Le knockout ou l'activation d'un gène peuvent être évalués en utilisant RPA 32 kDa subunit Antibody (9H8): sc-56770
- Tous les produits sont fournis en plasmides ADN purifiés et sont prêts à l'emploi, à l'exception des particules lentivirales d'activation qui sont préempaquetées en particules lentivirales pour une utilisation avec des cellules difficiles à transfecter.
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CRISPR/Cas9 KO Plasmid
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Plasmides Double Nickase
Plasmides d'Activation CRISPR
Particules Lentivirales d'Activation
Réactifs de Support CRISPR et HDR recommandés
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Anticorps Replication Protein A pour l'analyse des réponses cellulaires des Produits CRISPR Replication Protein A
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Les Plasmides KO CRISPR/Cas9, Plasmides Double Nickase et Plasmides d'Activation CRISPR/dCas9 sont considérés comme des "Produits sous Licence" et doivent être utilisés conformément à la Licence/Etiquette limitée. Pour en savoir plus, Cliquez ici
Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Les Plasmides CRISPR/Cas9 Knockout (KO) RPA 32 kDa subunit (h) consistent en un mélange de trois plasmides chacun codant la nucléase Cas9 et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique de RPA 32 kDa subunit, élaboré pour une extinction (knockout) optimale.
- Les séquences D'ARN guide (gARN) sont issues de la bibliothèque GeCKO (v2) et dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure du double brin (DSB) d'ADN génomique au niveau d'un site spécifique (%link_11%)
- Pour la sélection des cellules ayant subit avec succès un DSB induit par la Cas9, il est recommandé de co-transfecter avec le Plasmide HDR RPA 32 kDa subunit (h) (sc-401249-HDR)
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RPA 32 kDa subunit Antibody (9H8): sc-56770
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Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plamide HDR RPA 32 kDa subunit (h) est recommandé pour la co-transfection avec le Plasmide CRISPR/Cas9 KO RPA 32 kDa subunit (h)
- Le Plasmide HDR RPA 32 kDa subunit (h) correspond à un mélange de 2 à 3 plasmides, chacun contenant une matrice de réparation homologue dirigée de l'ADN (HDR) correspondant aux sites de coupure générés par le Plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant RPA 32 kDa subunit (h)
- Chaque matrice HDR correspond à deux bras homologues de 800 pb élaborés pour se lier spécifiquement à l'ADN génomique englobant le site de coupure de l'ADN double brin induit par Cas9
- Chaque Plasmide HDR intègre un gène de résistance à la puromycine afin de sélectionner les cellules dont le gène cible a été inactivé (KO) de façon stable et un gène RFP (Protéine Fluorescente Rouge) pour vérifier visuellement la transfection
- Les gènes de résistance à la puromycine et à la RFP sont encadrés de deux sites LoxP qui permettront d'être traités ulterieurement par le Cre Vector sc-418923
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- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RPA 32 kDa subunit correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Les paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (h2) RPA 32 kDa subunit diffèrent des paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (h) RPA 32 kDa subunit
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RPA 32 kDa subunit Antibody (9H8): sc-56770
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- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide CRISPR d'Activation (h) RPA 32 kDa subunit correspond à un système d'activation de la transcription par un médiateur d'activation synergique du système (SAM) spécifiquement conçu pour réguler positivement l'expression du gène
- RPA 32 kDa subunit Plasmide d'Activation CRISPR (h) est composé de trois plasmides au ratio 1:1:1 : un plasmide codant pour la nucléase Cas9 désactivée (dCas9) (D10A and N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64, et un gène de résistance à la blasticidine; un plasmide codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 et un gène de résistance à l'hygromycine; un plasmide codant pour un ARN guide spécifique de 20 nt fusionné avec deux aptamères ARN MS2, et un gène de résistance à la puromycine.
- Le complexe SAM résultant se lie à une région spécifique d'un site de départ de la transcription du gène cible et fournit un recrutement accru des facteurs de transcription pour une activation hautement efficace du gène cible
- Après transfection, l'efficacité d'activation du gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps : RPA 32 kDa subunit Antibody (9H8): sc-56770
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- 200 µl de Particules Lentivirales d'Activation CRISPR/dCas9 concentrées, prêtes à la transduction
- Les Particules Lentivirales d'Activation (h) RPA 32 kDa subunit correspondent à un système d'activation de la transcription par un médiateur d'activation synergique du système (SAM) spécifiquement conçu pour réguler positivement l'expression des gènes par transduction lentivirale des cellules
- Les Particules Lentivirales d'Activation (h) RPA 32 kDa subunit se compose des élements d'activation SAM suivants: une nucléase Cas9 désactivée (dCas9) (D10A et N863A) fusionnées avec le domaine de transactivation VP64; une protéine de fusion MS2-p65-HSF1 et un ARN guide cible spécifique de 20nt. Ils contiennent également des gènes de résistance à la blasticidine, l'hygromycine et la puromycine.
- Après transduction, le complexe SAM se fixe à une région du site spécifique d'environ 200-250 nt en amont du site de départ de la transcription du gène cible et fournit un recrutement accru des facteurs de transcription pour une activation hautement efficace du gène cible
- L'ARN guide des Particules Lentivirales d'Activation (h2) RPA 32 kDa subunit encode pour un ARNg cible spécifique de 20 nt qui diffère de l'ARN guide des Particules Lentivirales d'Activation (h) RPA 32 kDa subunit
- Après transfection, l'efficacité d'activation du gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps : RPA 32 kDa subunit Antibody (9H8): sc-56770
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO RPA 32 kDa subunit (h) | sc-401249 | 20 µg | $390.00 | |||
Plasmid HDR RPA 32 kDa subunit (h) | sc-401249-HDR | 20 µg | $437.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h) RPA 32 kDa subunit | sc-401249-NIC | 20 µg | $402.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RPA 32 kDa subunit | sc-401249-NIC-2 | 20 µg | $402.00 | |||
Plasmide CRISPR d'Activation (h) RPA 32 kDa subunit | sc-401249-ACT | 20 µg | $390.00 | |||
Plasmide CRISPR d'Activation (h2) RPA 32 kDa subunit | sc-401249-ACT-2 | 20 µg | $390.00 | |||
Particules Lentivirales d'Activation (h) RPA 32 kDa subunit | sc-401249-LAC | 200 µl | $447.00 | |||
Particules Lentivirales d'Activation (h2) RPA 32 kDa subunit | sc-401249-LAC-2 | 200 µl | $447.00 |