Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
RNase T2 Plasmides CRISPR (h)
- Espèces cibles : human; pour le produit correspondant mouse, voir >RNase T2a CRISPR Plasmids (m)
- Les plasmides CRISPR/Cas9 KO sont constitués de séquences d'ARN guide de 20 nt spécifiques de RNase T2 dérivées de la base de données GeCKO (v2)
- Pour le knockout de gène, les séquences d'ARN guide dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure double brin (DSB) dans l'ADN génomique
- Des plasmides CRISPR spécifiques pour le knockout et l'activation sont disponibles. Veuillez vous référer aux informations détailllées ici below
- Le knockout ou l'activation d'un gène peuvent être évalués en utilisant RNase T2 Antibody (E-5): sc-393729
- Tous les produits sont fournis en plasmides ADN purifiés et sont prêts à l'emploi, à l'exception des particules lentivirales d'activation qui sont préempaquetées en particules lentivirales pour une utilisation avec des cellules difficiles à transfecter.
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CRISPR/Cas9 KO Plasmid
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Les Plasmides KO CRISPR/Cas9, Plasmides Double Nickase et Plasmides d'Activation CRISPR/dCas9 sont considérés comme des "Produits sous Licence" et doivent être utilisés conformément à la Licence/Etiquette limitée. Pour en savoir plus, Cliquez ici
Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Les Plasmides CRISPR/Cas9 Knockout (KO) RNase T2 (h) consistent en un mélange de trois plasmides chacun codant la nucléase Cas9 et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique de RNase T2, élaboré pour une extinction (knockout) optimale.
- Les séquences D'ARN guide (gARN) sont issues de la bibliothèque GeCKO (v2) et dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure du double brin (DSB) d'ADN génomique au niveau d'un site spécifique (%link_11%)
- Pour la sélection des cellules ayant subit avec succès un DSB induit par la Cas9, il est recommandé de co-transfecter avec le Plasmide HDR RNase T2 (h) (sc-407931-HDR)
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RNase T2 Antibody (E-5): sc-393729
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Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plamide HDR RNase T2 (h) est recommandé pour la co-transfection avec le Plasmide CRISPR/Cas9 KO RNase T2 (h)
- Le Plasmide HDR RNase T2 (h) correspond à un mélange de 2 à 3 plasmides, chacun contenant une matrice de réparation homologue dirigée de l'ADN (HDR) correspondant aux sites de coupure générés par le Plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant RNase T2 (h)
- Chaque matrice HDR correspond à deux bras homologues de 800 pb élaborés pour se lier spécifiquement à l'ADN génomique englobant le site de coupure de l'ADN double brin induit par Cas9
- Chaque Plasmide HDR intègre un gène de résistance à la puromycine afin de sélectionner les cellules dont le gène cible a été inactivé (KO) de façon stable et un gène RFP (Protéine Fluorescente Rouge) pour vérifier visuellement la transfection
- Les gènes de résistance à la puromycine et à la RFP sont encadrés de deux sites LoxP qui permettront d'être traités ulterieurement par le Cre Vector sc-418923
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- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RNase T2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Les paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (h2) RNase T2 diffèrent des paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (h) RNase T2
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RNase T2 Antibody (E-5): sc-393729
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Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide CRISPR d'Activation (h) RNase T2 correspond à un système d'activation de la transcription par un médiateur d'activation synergique du système (SAM) spécifiquement conçu pour réguler positivement l'expression du gène
- RNase T2 Plasmide d'Activation CRISPR (h) est composé de trois plasmides au ratio 1:1:1 : un plasmide codant pour la nucléase Cas9 désactivée (dCas9) (D10A and N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64, et un gène de résistance à la blasticidine; un plasmide codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 et un gène de résistance à l'hygromycine; un plasmide codant pour un ARN guide spécifique de 20 nt fusionné avec deux aptamères ARN MS2, et un gène de résistance à la puromycine.
- Le complexe SAM résultant se lie à une région spécifique d'un site de départ de la transcription du gène cible et fournit un recrutement accru des facteurs de transcription pour une activation hautement efficace du gène cible
- Après transfection, l'efficacité d'activation du gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps : RNase T2 Antibody (E-5): sc-393729
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- 200 µl de Particules Lentivirales d'Activation CRISPR/dCas9 concentrées, prêtes à la transduction
- Les Particules Lentivirales d'Activation (h) RNase T2 correspondent à un système d'activation de la transcription par un médiateur d'activation synergique du système (SAM) spécifiquement conçu pour réguler positivement l'expression des gènes par transduction lentivirale des cellules
- Les Particules Lentivirales d'Activation (h) RNase T2 se compose des élements d'activation SAM suivants: une nucléase Cas9 désactivée (dCas9) (D10A et N863A) fusionnées avec le domaine de transactivation VP64; une protéine de fusion MS2-p65-HSF1 et un ARN guide cible spécifique de 20nt. Ils contiennent également des gènes de résistance à la blasticidine, l'hygromycine et la puromycine.
- Après transduction, le complexe SAM se fixe à une région du site spécifique d'environ 200-250 nt en amont du site de départ de la transcription du gène cible et fournit un recrutement accru des facteurs de transcription pour une activation hautement efficace du gène cible
- L'ARN guide des Particules Lentivirales d'Activation (h2) RNase T2 encode pour un ARNg cible spécifique de 20 nt qui diffère de l'ARN guide des Particules Lentivirales d'Activation (h) RNase T2
- Après transfection, l'efficacité d'activation du gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps : RNase T2 Antibody (E-5): sc-393729
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO RNase T2 (h) | sc-407931 | 20 µg | $390.00 | |||
Plasmid HDR RNase T2 (h) | sc-407931-HDR | 20 µg | $437.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h) RNase T2 | sc-407931-NIC | 20 µg | $402.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RNase T2 | sc-407931-NIC-2 | 20 µg | $402.00 | |||
Plasmide CRISPR d'Activation (h) RNase T2 | sc-407931-ACT | 20 µg | $390.00 | |||
Plasmide CRISPR d'Activation (h2) RNase T2 | sc-407931-ACT-2 | 20 µg | $390.00 | |||
Particules Lentivirales d'Activation (h) RNase T2 | sc-407931-LAC | 200 µl | $447.00 | |||
Particules Lentivirales d'Activation (h2) RNase T2 | sc-407931-LAC-2 | 200 µl | $447.00 |