Plasmide Double Nickase (h) RhoC: sc-401242-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RhoC correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RhoC Double Nickase (h) et le plasmide RhoC Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RHOC. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RhoC Antibody (C-10): sc-393090
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RhoC | sc-401242-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RhoC | sc-401242-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RHOC code la petite GTPase RhoC, un membre de la famille Rho qui agit comme un interrupteur moléculaire en alternant entre des états liés au GDP et au GTP afin de réguler le remodelage du cytosquelette d’actine. La signalisation de RhoC coordonne l’assemblage des fibres de stress, la dynamique des adhésions focales et la contractilité cellulaire via des effecteurs tels que ROCK et mDia, en s’intégrant à des voies qui contrôlent la polarité et la motilité cellulaires. Une activité altérée de RHOC a été associée à des phénotypes invasifs dans de multiples contextes tumoraux ainsi qu’à des modifications de l’organisation du cytosquelette influençant la dissémination métastatique. RHOC est donc largement utilisé comme nœud d’étude des réseaux de GTPases Rho, de la mécanotransduction et des programmes de signalisation liés à la migration dans les cellules humaines.
RhoC Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RHOC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RHOC. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RHOC. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RHOC.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.