RGS6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-404102-KO-2

Descripción general

RGS6 (regulador de la señalización de proteínas G 6) es una proteína humana de la familia RGS que acelera la hidrólisis de GTP en las subunidades Gα activadas, terminando así la señalización impulsada por GPCR. Modula vías de segundos mensajeros, incluidas cAMP/PKA y la señalización dependiente de calcio, dando forma a la excitabilidad neuronal, la electrofisiología cardíaca y las respuestas a neurotransmisores. RGS6 se ha vinculado a la regulación de la apoptosis y de las respuestas al estrés oxidativo, y su desregulación se estudia en el contexto de procesos neurodegenerativos, señalización relacionada con arritmias y vías asociadas a tumores. Como terminador de señales de GPCR, RGS6 es un nodo útil para desentrañar la dinámica de las vías aguas abajo de la activación del receptor y para cartografiar el crosstalk con MAPK y redes de respuesta al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RGS6 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RGS6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RGS6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RGS6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RGS6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RGS6 para la investigación de la señalización de RGS6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RGS6 críticos para la función de RGS6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RGS6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RGS6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RGS6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RGS6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RGS6 (h) y el plásmido HDR RGS6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RGS6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RGS6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.