Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) RG9MTD1: sc-418590-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RG9MTD1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RG9MTD1 Double Nickase (h) et le plasmide RG9MTD1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TRMT10C. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RG9MTD1 Antibody (A-8): sc-515289
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RG9MTD1 | sc-418590-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain TRMT10C code la sous-unité catalytique mitochondriale de la méthyltransférase tRNA:m1G9, tandis que RG9MTD1 (MRPP1) agit avec MRPP2 (HSD17B10) et MRPP3 (KIAA0391) au sein du complexe mitochondrial RNase P, qui couple le processing des ARNt à la méthylation m1G9. Cette activité est essentielle à la maturation des ARN mitochondriaux, au fonctionnement du mitoribosome et à l’efficacité de la phosphorylation oxydative, en garantissant une traduction mitochondriale fidèle. La perturbation du processing des ARNt dépendant de TRMT10C/RG9MTD1 dérègle la biogenèse de la chaîne respiratoire et l’homéostasie énergétique cellulaire, reliant cette voie aux phénotypes de dysfonction mitochondriale observés dans des contextes de maladies neurométaboliques. En conséquence, TRMT10C/RG9MTD1 est fréquemment étudié dans des modèles d’expression génique mitochondriale, de protéostasie et de réponses au stress, qui convergent vers le transport d’électrons et la signalisation liée à l’apoptose.
RG9MTD1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TRMT10C dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TRMT10C. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TRMT10C. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TRMT10C.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.