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RecQL1双切口酶质粒(h) | sc-402845-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RecQL1双切口酶质粒(h2) | sc-402845-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 RECQL 基因编码 RecQL1,这是一种 RecQ 家族的 3′–5′ DNA 解旋酶,在 DNA 复制与修复过程中维护基因组稳定性。RecQL1 参与复制叉重启、停滞或回退复制叉的处理,以及与重组相关的中间体解析,因此与 DNA 损伤应答的核心过程密切相关。通过这些作用,它有助于精确调控姐妹染色单体交换,并在基因毒性应激下维持染色体完整性。RECQL/RecQL1 功能异常与复制应激升高及基因组不稳定等表型有关,这些表型与癌症生物学及 DNA 修复缺陷相关研究密切相关。
RecQL1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RECQL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RECQL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RECQL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RECQL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。