Plasmide CRISPR/Cas9 KO RBM24 (h): sc-410387

Présentation

RBM24 (RNA binding motif protein 24) est une protéine de liaison à l’ARN enrichie dans le muscle, qui régule l’expression génique post-transcriptionnelle en contrôlant l’épissage alternatif, la stabilité des ARNm et la localisation des transcrits. Elle contribue à la différenciation myogénique et à l’organisation des sarcomères grâce à la coordination de programmes d’ARN spécifiques du muscle et à des interactions fonctionnelles avec la machinerie d’épissage et de traduction. L’activité de RBM24 a été associée au développement du muscle cardiaque et squelettique, et des altérations du traitement des ARN dépendant de RBM24 sont liées à des phénotypes associés à la cardiomyopathie ainsi qu’à des états de différenciation dérégulés. Comme RBM24 module le choix des isoformes et le devenir des ARN, elle est fréquemment étudiée dans des voies gouvernant l’assemblage du cytosquelette, le couplage excitation–contraction et le remodelage en réponse au stress.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO RBM24 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RBM24 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RBM24, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RBM24 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine RBM24.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RBM24 pour l'étude de la signalisation de RBM24, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de RBM24 essentiels à la fonction de RBM24
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RBM24 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le RBM24 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le RBM24 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RBM24. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le RBM24 plasmide HDR (h) et le RBM24 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RBM24 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RBM24 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.