RASAL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422603
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RASAL1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RASAL1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RASAL1 Anticorpo (B-2): sc-398025
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RASAL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422603 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Rasal1 codifica o RASAL1, uma proteína ativadora de GTPase de Ras que acelera a conversão de Ras-GTP ativo em Ras-GDP inativo, limitando assim a sinalização dirigida por Ras. Ao modular a atividade das vias downstream RAF–MEK–ERK e PI3K–AKT, o RASAL1 influencia programas de proliferação, sobrevivência e diferenciação celular, incluindo efeitos dependentes do contexto sobre fenótipos epiteliais e mesenquimais. Alterações na função ou na expressão de RASAL1 têm sido associadas a desregulação do controle de crescimento e a remodelamento fibrótico em múltiplos tecidos, sustentando sua relevância para estudos de homeostase de sinalização e reprogramação celular associada a doenças em modelos murinos. Essas propriedades tornam o Rasal1 um nó útil para dissecar o feedback da via de Ras e o cross-talk com redes regulatórias transcricionais e da matriz extracelular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RASAL1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Rasal1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Rasal1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Rasal1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RASAL1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Rasal1 para a investigação da sinalização de RASAL1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Rasal1 críticos para a função RASAL1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Rasal1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RASAL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo RASAL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Rasal1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RASAL1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR RASAL1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Rasal1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Rasal1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.