Plasmide Double Nickase (h) RAD51AP1: sc-408187-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RAD51AP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RAD51AP1 Double Nickase (h) et le plasmide RAD51AP1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RAD51AP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RAD51AP1 | sc-408187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RAD51AP1 | sc-408187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAD51AP1 (protéine 1 associée à RAD51) est un facteur de réparation de l’ADN qui interagit avec RAD51 afin de favoriser la recombinaison homologue lors des dommages associés à la réplication et de la réparation des cassures double brin. Elle soutient l’invasion de brin médiée par RAD51 et la formation de boucles en D (D-loop), contribuant à la stabilisation et au redémarrage des fourches de réplication bloquées ainsi qu’au maintien de l’intégrité du génome. L’activité de RAD51AP1 est liée à des processus centraux de la réponse aux dommages de l’ADN, notamment la signalisation du point de contrôle de la phase S et la résolution du stress réplicatif. Une expression ou une fonction altérée de RAD51AP1 a été associée à des phénotypes d’instabilité génomique observés dans de nombreux types de cancers, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques des dépendances des cellules tumorales en matière de réparation de l’ADN.
RAD51AP1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RAD51AP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RAD51AP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RAD51AP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RAD51AP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.