Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Rab 12 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-415015
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Rab 12 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Rab 12, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rab 12 Anticuerpo (H-11): sc-515613
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Rab 12 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-415015 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RAB12 codifica Rab12, una pequeña GTPasa que regula el tráfico de membranas dentro del sistema endosomal–lisosomal. Rab12 contribuye a la dinámica de los endosomas tardíos y los lisosomas, influyendo en la clasificación de la carga, el recambio de receptores y las vías de degradación asociadas a la autofagia. Al modular el tráfico intracelular y la proteostasis, Rab12 puede afectar las respuestas celulares al estado nutricional y a las redes de señalización de estrés. La desregulación del transporte dependiente de GTPasas Rab se ha asociado con alteraciones del metabolismo y fenotipos invasivos, lo que respalda la investigación de RAB12 en modelos celulares relevantes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Rab 12 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RAB12 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RAB12 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RAB12 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Rab 12.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RAB12 para la investigación de la señalización de Rab 12, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RAB12 críticos para la función de Rab 12
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RAB12 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Rab 12 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Rab 12 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RAB12. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Rab 12 (h) y el plásmido HDR Rab 12 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RAB12 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RAB12 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.