Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) PTP22: sc-416917-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PTP22 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PTP22 Double Nickase (h) et le plasmide PTP22 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PTPN22. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PTP22 Antibody (E-5): sc-393766
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PTP22 | sc-416917-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PTP22 | sc-416917-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTPN22 code la protéine tyrosine phosphatase non récepteur de type 22 (PTP22), une phosphatase cytosolique qui atténue la signalisation en aval des récepteurs antigéniques en déphosphorylant des kinases clés et des protéines adaptatrices. Dans les cellules immunitaires, PTP22 module les seuils d’activation et influence des voies liées à la signalisation du récepteur des lymphocytes T (TCR) et du récepteur des lymphocytes B (BCR), notamment via un contrôle dépendant de la phosphorylation des voies MAPK et des sorties NF-κB. Des études génétiques et fonctionnelles ont associé une activité altérée de PTP22 à une dérégulation de la tolérance immunitaire et de la signalisation inflammatoire. Ainsi, PTPN22 est largement étudié dans des modèles de susceptibilité aux maladies auto-immunes, de différenciation des cellules immunitaires et de remodelage des réseaux de signalisation.
PTP22 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PTPN22 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PTPN22. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PTPN22. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PTPN22.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.