Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) PTEN: sc-422475-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) PTEN correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PTEN Double Nickase (m) et le plasmide PTEN Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Pten. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PTEN Antibody (A2B1): sc-7974
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) PTEN | sc-422475-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) PTEN | sc-422475-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Pten** code PTEN, une phosphatase des lipides et des protéines qui antagonise la signalisation PI3K en déphosphorylant le PIP3 en PIP2, limitant ainsi l’activité de la voie AKT/mTOR. Par ce rôle, PTEN régule la croissance, la survie, la prolifération, la migration cellulaires et l’homéostasie métabolique, et influence la stabilité du génome ainsi que les réponses aux dommages de l’ADN. La perturbation de la signalisation dépendante de PTEN est largement utilisée pour modéliser une signalisation des facteurs de croissance dérégulée et des programmes de différenciation cellulaire altérés dans les systèmes mammifères. En biologie de la souris, **Pten** est fréquemment étudié dans des contextes tels que le développement tissulaire, la régulation immunitaire et la fonction neuronale, où l’amplitude de la signalisation PI3K–AKT est un déterminant clé du phénotype.
PTEN Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Pten dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Pten. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Pten. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Pten.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.