Plasmide Double Nickase (h) PSS2: sc-404133-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PSS2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PSS2 Double Nickase (h) et le plasmide PSS2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PTDSS2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PSS2 | sc-404133-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PSS2 | sc-404133-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTDSS2 code la phosphatidylsérine synthase 2 (PSS2), une enzyme membranaire du réticulum endoplasmique qui catalyse la production de phosphatidylsérine par échange de base à partir de la phosphatidyléthanolamine. Cette activité contribue au remodelage des glycérophospholipides, à la biogenèse des membranes et à l’homéostasie des organites, et elle influence des processus en aval tels que la signalisation apoptotique, dans laquelle l’externalisation de la phosphatidylsérine constitue un signal cellulaire clé. La composition lipidique dépendante de PTDSS2 peut moduler le trafic vésiculaire, les réponses au stress du RE et la transduction de signaux médiée par les lipides. Des altérations du métabolisme de la phosphatidylsérine et de l’équilibre lipidique du RE ont été associées à une dérégulation des voies de croissance et de survie dans de multiples contextes pathologiques, notamment le reprogrammation métabolique liée au cancer.
PSS2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PTDSS2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PTDSS2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PTDSS2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PTDSS2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.