PRK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407649-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRK2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PRK2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PRK2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PKN2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PRK2 Anticorpo (A-3): sc-271971
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407649-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407649-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PKN2 codifica a proteína quinase N2 (PRK2), uma quinase de serina/treonina que atua como efetora de GTPases da família Rho para coordenar a remodelação do citoesqueleto, a contratilidade actina–miosina e a dinâmica de adesão celular. A PRK2 contribui para módulos de sinalização que se cruzam com a adesão focal e a organização de fibras de estresse, influenciando alterações na forma celular, migração e citocinese. Por meio da regulação de eventos de fosforilação nessas vias, alterações na atividade ou expressão de PRK2 são estudadas em contextos de motilidade aberrante, fenótipos invasivos e sinalização de crescimento desregulada relevantes para o câncer e a biologia vascular. A PRK2 também é investigada por seus papéis em respostas ao estresse celular e no “crosstalk” de redes de quinases que moldam programas de proliferação e sobrevivência.
PRK2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PKN2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PKN2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PKN2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PKN2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.