Plasmide Double Nickase (h) PRDM16: sc-403464-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PRDM16 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PRDM16 Double Nickase (h) et le plasmide PRDM16 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PRDM16. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PRDM16 Antibody (174A2D): sc-517625
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PRDM16 | sc-403464-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PRDM16 | sc-403464-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDM16 code un régulateur transcriptionnel à doigts de zinc contenant un domaine PR/SET, qui intègre le contrôle épigénétique aux programmes d’expression génique spécifiques de lignée. Il est surtout connu pour coordonner les décisions de destin des adipocytes, notamment l’adipogenèse brune et beige, via des interactions avec des co-régulateurs et la modulation de réseaux de gènes liés au métabolisme mitochondrial et oxydatif. PRDM16 contribue également aux états transcriptionnels du développement et des cellules souches/progénitrices, en influençant la différenciation et l’homéostasie tissulaire. Une expression dérégulée de PRDM16 ou des réarrangements impliquant ce gène ont été associés à des phénotypes métaboliques altérés et à des programmes transcriptionnels oncogéniques dans certains contextes hématologiques, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques centrées sur des voies.
PRDM16 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PRDM16 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PRDM16. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PRDM16. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PRDM16.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.